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  • 達(dá)氏鱘dmc1基因的克隆及在精子生成中的表達(dá)分析

    摘要: DNA減數(shù)分裂重組酶1基因(disrupted meiotic cDNA,dmc1)是一個(gè)在減數(shù)分裂時(shí)期特異表達(dá)的基因,為減數(shù)分裂同源染色體配對(duì)所必需。為研究dmc1基因在達(dá)氏鱘(Acipenser dabryanus)不同組織的表達(dá)特征,從達(dá)氏鱘性腺轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)搜索得到該基因并設(shè)計(jì)引物,克隆獲得達(dá)氏鱘dmc1的編碼區(qū)序列,其中開放閱讀框(ORF)為1 029 bp,編碼342個(gè)氨基酸。運(yùn)用生物信息學(xué)方法分析達(dá)氏鱘dmc1基因編碼的蛋白序列和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系,推測(cè)達(dá)氏鱘Dmc1蛋白的分子量為82.696kDa,理論等電點(diǎn)(PI)為5.04;多重序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),Dmc1 氨氮酸序列在進(jìn)化中可能比較保守。系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,AdDmc屬于RecA家族Dmc1蛋白分支,且與四足動(dòng)物類聚為一支。RT-PCR結(jié)果表明,dmc1基因在精巢和卵巢中特異表達(dá)。結(jié)合組織學(xué)結(jié)果通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究dmc1基因在精子生成過程中的表達(dá)特征發(fā)現(xiàn),dmc1基因在0~Ⅰ期精巢中不表達(dá);在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期精巢中,其表達(dá)量逐漸升高并在Ⅳ期精巢中達(dá)到最高;在Ⅴ期精巢中,其表達(dá)量顯著性下降(P<0.05),因此推斷達(dá)氏鱘dmc1基因可能是減數(shù)分裂時(shí)期特異表達(dá)的基因,研究結(jié)果可為后續(xù)達(dá)氏鱘初級(jí)和次級(jí)精母細(xì)胞的鑒定奠定基礎(chǔ)。


    向浩, 葉歡, 李創(chuàng)舉, 楊俊琳, 厲萍, 杜浩, 危起偉. 達(dá)氏鱘dmc1基因的克隆及在精子生成中的表達(dá)分析. 洋漁業(yè), 2019, 41 (4): 434-443.


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